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    耐藥細胞株的建立
    點擊次數:1902 發布時間:2018-03-16
       耐藥細胞株的建立就是體外低濃度培養細胞,逐漸誘導耐藥??墒钦麄€過程耗時長,易受污染,成功率一般。后來了解到還可以通過裸鼠荷瘤的方式,給裸鼠腹腔注射藥物逐漸誘導耐藥,zui后取瘤組織研碎制成細胞懸液在再培養幾代可得腫瘤細胞。這樣時間就縮短了很多~而且不受污染等條件限制。耐藥細胞株的建立實驗是通過細胞與低劑量的藥物長期接觸,引起細胞本身生物化學過程的改變,細胞膜上出現Pgp(或P-170)糖蛋白,使細胞逐漸對藥物耐受。
      耐藥細胞株的構建:
      實驗目的:構建對特定藥物產生耐藥性的腫瘤細胞株
      實驗原理:采用體外低濃度梯度遞增聯合大劑量間斷沖擊方法誘導腫瘤細胞對特定藥物產生耐藥性
      實驗儀器:超凈工作臺、CO2培養箱、生物倒置顯微鏡
      實驗內容與方法:
      1. 體外低濃度梯度遞增聯合大劑量間斷沖擊方法誘導細胞的耐藥性
      2. MTT法測定藥物對親本細胞和耐藥細胞的IC50,計算耐藥指數
      耐藥細胞株注意事項:
      1、觀察細胞在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,否則不能準確判斷細胞的傳代密度??醇毎男螒B請在10X或20X物鏡下。
      2、瓶中運輸培養基不能重復再用,請換用加雙抗的新培養基,細胞凍存后,培養基中可不加任何抗生素。
      3、有些細胞貼壁不牢,如發現貼壁細胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶內。
      4、收到細胞后,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請及時與我們。
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